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顯微鏡鏡象亮度以及視野大小的關(guān)鍵所在

鏡象亮度指的是顯微鏡中所看到的物象的亮暗程度。要看清楚物體的細(xì)節(jié)，必須要求一定的亮度，也就是鏡象亮度，它與數(shù)值孔徑的平方成正比，與總放大倍數(shù)的平方成反比。在物鏡相同的情況下，使用5X的目鏡比使用10X的目鏡，鏡象亮度要大四倍，所以要想使鏡象亮度大，可以使用大數(shù)值孔徑的物鏡，配以低放大倍數(shù)的目鏡。

比方說(shuō)，使用40X的N.A.為0.65的物鏡配以5X的目鏡和使用10x的N.A.為0.25的物鏡配以20X的目鏡相比較，雖然總放大率都是200X，可是前者的鏡象亮度比后者大六點(diǎn)八倍。在實(shí)際觀(guān)察物體的時(shí)候，并不是鏡象越亮越好，假如鏡象亮度太大，一通過(guò)標(biāo)本的光線(xiàn)太強(qiáng)，會(huì)影響圖象的反差且不利于保護(hù)眼睛視力，因此要求將鏡象亮度調(diào)至適中，同時(shí)根據(jù)不同標(biāo)本厚度加以調(diào)節(jié)，對(duì)于厚的標(biāo)本可以適當(dāng)增加亮度，反差好的標(biāo)本也可適當(dāng)增加亮度。

而且所謂的視野指的是是視場(chǎng)，說(shuō)白了就是顯微鏡一次所能觀(guān)察到被檢標(biāo)本的范圍。通常來(lái)講顯微鏡的視野是很小的，它的大小和顯微鏡的總放大倍數(shù)成反比，總放大倍數(shù)越大的時(shí)候，顯微鏡的視野越小。所以顯微鏡尤其是高放大倍數(shù)情況下，不可能在一個(gè)視野內(nèi)看到整個(gè)標(biāo)本，只能觀(guān)察到標(biāo)本的某個(gè)部位。假如需妥觀(guān)察標(biāo)本的其他部位的時(shí)候，一定要利用移動(dòng)器移動(dòng)標(biāo)本，使標(biāo)本中的各部分依次進(jìn)入視野內(nèi)，輪流觀(guān)察。

光學(xué)顯微鏡的幾個(gè)主要性能之間有著一定的相互關(guān)系。是不是看清楚小的物體或細(xì)節(jié)，主要決定于物鏡的分辨率，也就是數(shù)值孔徑，并不決定于倍數(shù)，認(rèn)為倍數(shù)越高看得越清楚的想法是不完全正確的。假如不增高分辨率。只是盡量增大倍數(shù)，雖然能夠獲得更高的放大倍數(shù)的圖象，可是并不可能看出更多的細(xì)節(jié)，這種放大叫做“空的放大”。為了充分利用物鏡的分辨率，顯微鏡的總放大倍數(shù)相應(yīng)也不能太小，不然的話(huà)本來(lái)可以看清楚的一些物體細(xì)節(jié)，會(huì)因?yàn)榭偡糯蟊稊?shù)過(guò)小，擠在一起而分辨不出。

同一物鏡分辨率隨放大倍數(shù)增大而提高，隨倍數(shù)減小而降低，例如數(shù)值孔徑為0.65的物鏡，在總放大倍數(shù)小于一百六十倍的時(shí)候，分辨率降為7微米，當(dāng)總放大倍數(shù)增至一千六百倍的時(shí)候，分辨率提高到1.6微米以上。

顯微鏡合適的總放大倍數(shù)決定于物鏡數(shù)值孔徑N.A.值的500倍至1000倍，假如N.A.值為0.65的40倍物鏡，合適的總放大倍數(shù)應(yīng)為0.65x500倍。0.65x1000即325倍至650倍。所以，為了達(dá)到合適的總放大倍數(shù)應(yīng)配合適當(dāng)倍數(shù)的目鏡。

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